NHRI Communications
EB病毒再活化時的基因調控
Epstein-Barr病毒﹙EB病毒﹚與一些衍生自淋巴球或上皮細胞的人類惡性腫瘤，例如巴氏淋巴癌、何杰金氏淋巴癌與鼻咽癌密切相關。雖然EB病毒在這些已形成的癌細胞中主要呈現潛伏期感染，但仍有許多證據指出：體內EB病毒再活化進入溶裂期，不但是一項罹癌的風險因子，也是診斷、癒後和復發的顯著標記。最近Dr. Shannon Kenney的實驗室使用SCID小鼠的動物模式，發現無法進入溶裂期的EB病毒突變種會喪失早期促進B淋巴球增生的能力；而本院癌症研究所陳振陽老師的研究團隊則發現EB病毒的再活化與細胞基因的不穩定性有關，進一步突顯EB病毒溶裂期感染在腫瘤發生時所扮演的角色。我們實驗室從基因調控的觀點切入EB病毒再活化的研究，希望瞭解溶裂期病毒基因的表現是如何被啟動，而這些病毒蛋白又如何影響細胞基因的表現，藉以釐清EB病毒再活化在致癌過程中的意義。這些線索將有助於發展應用策略，設法抑制EB病毒的再活化以阻斷它的致癌機制。
在最近與台大微生物所蔡錦華老師的合作研究中，我們分析了EB病毒潛伏期感染和溶裂期感染的細胞基因表現有何差異，發現一個名為early growth response-1﹙Egr-1﹚的細胞轉錄因子會隨著EB病毒的再活化而大量表現。目前已知Zta和Rta是EB病毒溶裂期最早表現的兩個轉錄活化蛋白，不但負責啟動病毒溶裂期基因的表現，同時也會調控一些細胞基因的表現。我們的研究發現Egr-1在病毒溶裂期的表現是被Zta所誘發的：Zta能活化Egr-1基因的啟動子(promoter)，造成Egr-1 RNA和蛋白質的增加。
為了進一步探討Zta誘發Egr-1表現的分子機制，首先我們鑑定出Egr-1基因的啟動子上具有兩段Zta反應區域。循著這兩段反應區域追蹤下去，我們釐清了Zta至少透過兩種機制以累加的效果去誘發Egr-1的表現：Zta蛋白不但本身會直接結合到Egr-1基因啟動子的Zta反應序列﹙ZRE﹚上，同時也會經由活化細胞內ERK訊息傳遞途徑，藉以促進細胞轉錄因子Elk-1蛋白結合到Egr-1啟動子的SRE-Ets序列。
值得注意的是，根據我們的研究結果，加上過去文獻已發表的資料，Zta、Rta和Egr-1之間似乎能交互促進彼此的表現，形成正回饋的調控網絡(如圖)，讓這三個轉錄活化蛋白在溶裂期的初始階段能有效率的累積，藉此驅動下游基因的表現。為了證明Egr-1在這個回饋網絡中的重要性，我們在EB病毒自發性再活化的過程中以RNA干擾技術阻斷Egr-1的表現，結果Zta和Rta、甚至其下游溶裂期基因的表現亦受到明顯的抑制，因此Egr-1或將成為有效阻斷EB病毒再活化的下手標的之一。另一個值得注意的線索是：Egr-1曾被報導過與廣泛的生物功能有關，包括細胞生長、凋亡、分化、發炎或對壓力刺激的反應，因此Zta或許能經由Egr-1去影響多種生物活性，介入腫瘤的生成，目前我們已經著手篩檢受到Zta和Egr-1調控的細胞基因。
以上的研究成果發表於國際期刊Journal of Virology (80:7748-7755).
《文/圖：臨床研究組張堯》
NIH 研究計畫電子收件措施
美洲華人生物科學學會為促進世界各地生物及醫學領域之華裔專家學者及研究人員之交流，定期舉辦學術討論會議，2006年大會於今(95)年7月19至23日於美國舊金山舉行，針對基礎、應用、臨床之醫學研究、新興之生物醫學科學，及生物科技研究等領域進行深入探討。
第一場研習會於7月19日下午2:00開始舉行，主題為美國國家衛生研究院(National Institutes of Health, 以下簡稱NIH) 研究計畫申請，主要探討NIH之電子化，如何在電子e世代獲得計畫補助? (NIH Grant Application Workshop: NIH Goes Electronic: How to Get Grant Support in the E-Age? )，其中一個有趣的講題為研究計畫電子申請(Electronic Grant Submission)，由NIH藥物濫用研究所(National Institute on Drug Abuse/NIH/DHHS) 院外處處長Dr. Teresa Levitin主講，深入淺出說明美國NIH研究計畫走向電子申請之推動過程與步驟，謹摘要如下。
電子化申請整體效益
NIH於2005年收到75000件研究計畫申請案，自2006年起，NIH逐步推動研究計畫從紙本申請走向電子化申請，頗具成效。NIH計畫補助電子化的實施期程，首先由數量較少的個人研究計畫與小型補助計畫開始(例如R21 and R03電子申請於2006年6月啟動)。NIH預定宣布 R01計畫合約補助計畫於2007年2月1日起啟動電子申請。其效益包含消除收集紙本計畫的負擔，縮短申請到確定補助之流程，提升效率。電子化產生可觀的資料庫做為知識管理及其他分析引用參考依據，電子驗證機制且增進資料的正確性與品質，而電子申請可節省二億張以上的紙張與無數的人力成本，減少掃描、影印、與資料登錄的人力成本；同時，計畫之影像較為清晰且為彩色影像等。
Grants.gov 入口網站與 NIH 計畫申請電子化的實施步驟
Grants.gov 是美國聯邦政府單一線上申請計畫的入口網站，提供個人、企業、州政府、或地方部落政府，以電子化方式蒐尋研究補助機會及提出申請。目前 Grants.gov 是一個跨機構的入口網站(http://www.Grants.gov)，包含900個計畫補助類型，26個計畫補助機構，每年補助金額逾3500億美元($350 billion)。
NIH計畫補助電子化的實施步驟，是先將補助機會公布於Grants.gov 網站之”Apply”大項中，一般為申請日兩個月前公布時即提供應用軟體於線上供申請者下載及使用，計畫申請開始日期即為Grants.gov線上受理電子申請的第一天 (Open date)，凡以該應用軟體撰寫完成的計畫即可於Open date起上線申請。
從Grants.gov 網站 或 NIH申請手冊獲知申請機會後，電子收件處理步驟如下：
步驟1：下載申請應用軟體(PureEdge Software 讀取軟體可於線上免費下載)。
步驟2：撰寫完成研究計畫。
步驟3：透過授權機構代表(Authorized Organizational Representative，AOR)於Grants.gov 網站於線上送出申請。
步驟4：在收到NIH通知已成功收件後，可於線上NIH Commons查尋申請案之現況。
步驟5：eRA軟體將檢視申請案是否依照NIH規定撰寫，如預算編列，頁數限制，是否已附上必須繳交之資料等等。
步驟6：申請案一旦通過檢視，SF424 (R&R)計畫申請結果影像將顯示於NIH Commons 網頁上，申請者有兩天時間可觀看該申請結果，如為NIH接受，申請者就完成送出程序，NIH將受理該申請案，如有問題SO不被接受，就不會顯示在NIH Commons，必須修正後再送出到 Grants.gov。(Principal Investigators should view image too, but authority to reject is with SO)。
步驟7：申請案未照NIH規定撰寫將發生錯誤，以警告(Warnings)和錯誤(Errors)兩種方式列出。警告不致於終止申請案繼續送審，錯誤則務必要完成修正後再送到Grants.gov重新申請。
步驟8：無錯誤的申請案將會進入送審階段(the referral process)，由研究所及審查委員會分派審查。
申請電子提送計畫的準備工作(雙重登記)
1. 第一項登記：Grants.gov網站受理兩種登記，首先，申請機構須登記成為 Central Contractor Registry (CCR)，並取得DUNS編號 (Data Universal Numbering System number)，只要申請一次即可，此DUNS編號適用於所有美國聯邦機關之電子申請。細節可至http://grants.gov/GetStarted網頁查詢。此項登記不需等到有申請機會才提出，但是要特別注意，這項申請作業至少要四週才能完成，所以一定要在申請計畫日截止前四週提出申請。
2. 第二項登記：eRA Commons申請機構必須登記，只要申請一次即可。研究計畫主持人(Principal Investigator，PI)必須透過該所屬機構申請登記；同樣的，這項申請作業至少要四週才能完成，所以機構與PI一定都要在申請計畫日四週前提出申請。
綜言之，在登記方面包含: 申請者需要有DUNS number (機構)，NCage number (機構)， Central Contractor Registration number (機構每年編號)，Grants.net registration (機構)，NIH Commons (機構和計畫主持人)。
申請計畫的技術問題
1. 申請機構必須填寫所有必填欄位，從Grants.gov 網站下載 PureEdge 軟體的讀取軟體(Viewer)以利直接線上申請。要注意，使用麥金塔電腦者現在必須PC emulator才能使用PureEdge 表單。
2. 申請機構也可以自行建置系統對系統XML交換機制與Grants.gov交換文件。
3. 所有附檔須以PDF型式繳交，例如 cover letter，附錄等。Grants.gov列出一些可用工具軟體於http://www.grants.gov/assets/PDFConversion.pdf網頁上。
4. Grants.gov與麥金塔電腦不相容，Grants.gov已與NIH合作開發Citrix Server供所有使用者使用，此Citrix Server免費提供非Windows使用者下載和撰寫PureEdge表單，並可供非Windows使用者完成電子申請。細節請參考http://www.grants.gov/MacSupport網頁說明。
電子申請 適應之道:
1. 研究人員需預留足夠時間來進行電子申請，練習申請軟體，以避免萬一需要更多時間來適應。特別要注意，過去NIH計畫申請截止日期以郵寄的郵戳日期為準，改為電子收件後則以截止日期當天下午五時整為截止時間。該電子收件一開始以 NIH 所在時區下午五時整為截止時間，目前已改善為美國國內申請機構所在時區之下午五時整，逾時不候。因此，申請者需要有充份的時間來進行電子申請，尤其要注意避免網路壅塞。
2. 到NIH網站上觀看更新資訊與新的常問問題集(Q&As) 。有疑問要早點問，經常問。
3. 電子申請需要申請機構與計畫主持人共同完成。 事先登記取得編號才能送出電子申請。
4. 送出電子申請後，必須查看並確認申請的結果。
《文：陳麗秋；圖：Grant.gov & NIH 網站內容》
國衛院合唱團招募團員
快樂的時候，心裡會充滿著跳躍的音符嗎？
悲傷的時候，耳中會響起低迴的旋律嗎？
喜愛以音樂抒發情感的人，有一個正適合你的社團―國家衛生研究院合唱團！
國衛院合唱團的演唱曲目與學習內容相當多樣化，曲目已涵括迪斯尼動畫歌曲”A Whole New World”、聖歌”Amazing Grace”、經典歌曲”Perhaps Love”、”You Are My Sun Shine”，還有台灣民謠「農村酒歌」，以及國語歌曲「月亮代表我的心」、「萍聚」等。
合唱團平時一星期練唱一次，並計畫於每季舉辦成果發表、演唱會、或音樂學習演講。合唱團也配合院內慶典進行表演，例如2005年年終的感恩音樂會和最近的伍院長就職典禮等，合唱團均應邀表演。七夕情人節時，還提供院內同仁真情大放送的點歌服務。我們期望藉由這些活動使國衛院成為充滿優美旋律的愉悅環境。除了上述活動之外，其他院外的音樂活動我們也積極參與，平時團員互通訊息，相約欣賞各式音樂會。歡迎喜愛合唱、熱愛音樂與分享喜悅的同好，加入我們的行列!!
國衛院合唱團FAQ:
1. 我從來沒有參加過合唱團，沒有音樂基礎也可以參加嗎？
多數團員並沒有合唱經驗，或是不具視譜能力，認真練習後同樣在表演時有精采的演出。所以並不需要合唱經驗，只要有熱忱，喜歡唱歌，樂於分享喜樂，都歡迎加入。
2. 我唱歌的聲音很小（或很特殊），可以參加合唱團嗎？
合唱和研究一樣是群策群力的活動。再細微的聲音，我們會讓它聽得見。再突出的聲音，我們要讓它和諧，融入混聲之美。尤其是曲目多樣化之後，各式各樣的聲音都有表現的空間。
3. 為什麼要參加合唱團？
合唱是休閒娛樂，可以豐富你的生活與生命、抒解你的身心、淨化你的心靈，當然也會提高工作效能喔!合唱團為同仁開闢了一個喜好合唱、充滿音樂氣息的園地，提供以歌會友，訓練音樂能力的機會，希望藉合唱達到享受音樂和諧之美。合唱是合作精神最高表現的團體活動之一，培養合唱經驗，可以讓你體會團隊合作的喜悅。合唱團的成員來自院內各層面，也可讓你認識更多院內不同單位的同好，更融入國衛院這個大家庭!
4. 團體練唱的時間？地點？
目前竹南院區的團員固定在每星期三，中午12:30-13:30，於行政大樓A2106室練習。台北院區的團員則是在每星期三，中午12:20-13:10，於國醫中心2319室練習。
5. 我決定參加國衛院合唱團，那我要怎麼做呢？
竹南院區同好請與李桂玉（分機33610）或吳雨珊（分機35755）聯繫。台北院區請與游舒翎（分機25149）聯繫。也可email 至choir@nhri.org.tw，或是直接在練唱時間到練唱地點，臨場感受和聲的美妙。如果你一時無法決定，請跟我們聯絡，來練唱一兩次試試看。
《文：陳怡榮，李桂玉；攝影：陳麗秋》
技術移轉室專題演講－Jake J. Thiessen, Ph.D.
主講人：Jake J. Thiessen, Ph.D.
(Hallman Director, School of Pharmacy University of Waterloo)
講題：New Pharmaceutical Opportunities at the University of Waterloo: Implications for Education, Patient Care, Research, and Innovation
時間：民國95年5月5日 上午10:00至12:00
地點：國衛院竹南院區研究大樓R1-B1222演講廳
主辦單位：國家衛生研究院技術移轉室
觀看影音節目需要 Windows Media Player 請按此處下載
《文：何書賢；圖：Jake J. Thiessen, Ph.D.；影音整理：賴崇文、何書賢》