NHRI Communications
院務紀事
基因轉殖鼠核心實驗室—基因改造小鼠產製、淨化及保種之技術服務
Transgenic Mouse Core–Technical services for generation, rederivation, and preservation of genetically-modified mice
本院基因轉殖鼠核心實驗室的設立，旨在提供穩定且高品質之基因改造小鼠相關技術服務，使院內研究人員得以有效率地獲得符合其研究所需之基因改造小鼠，藉以創造優良的人類疾病動物模式，進一步應用於生物醫療相關實驗與新藥開發。本核心實驗室提供及規劃之技術服務項目包括：小鼠原核顯微注射、小鼠淨化、小鼠胚胎冷凍保存、復育、小鼠囊胚顯微注射、TALEN及CRISPR/Cas9顯微注射與技術服務相關諮詢等，服務內容簡述如下（服務說明詳參本核心實驗室網頁： http://tmc.nhri.org.tw/）：
- 小鼠原核顯微注射：利用顯微操作設備，將研究人員提供之轉殖基因DNA注射至小鼠受精卵之原核，再將其移植至代理孕母鼠體內，使其懷孕並產出攜帶轉殖基因之小鼠。
- 小鼠囊胚顯微注射：將經基因標的之小鼠胚幹細胞注射入囊胚，再移至代理孕母鼠體內使其懷孕且產下嵌合小鼠，已完成相關技術平台建立，並可成功地獲得具有生殖傳遞能力之嵌合小鼠（服務流程建置中）。
- TALEN及CRISPR/Cas9顯微注射：在基因剔除小鼠產製過程中應用此基因編輯技術，僅須將TALEN或Cas9 mRNA（Cas9須搭配guide RNA）以顯微注射方式注入受精卵，再移至代理孕母鼠體內並懷孕產出，經定序篩選後即可獲得基因剔除小鼠，此舉大幅縮短傳統產製過程所需漫長之標的基因構築、胚幹細胞篩選及小鼠配種繁殖的時間。在積極測試下，已順利產生基因剔除小鼠（服務流程建置中）。
- 小鼠淨化：攜帶特定病原之小鼠，經超數排卵及配種，取其二細胞期胚進行淨化，再移植至乾淨之代理孕母鼠體內懷孕並產出，通過本院實驗動物中心健康監測後，即完成淨化。
- 小鼠胚胎冷凍：取小鼠八細胞期胚，以玻璃管法（vitrification）進行冷凍，保存於液態氮桶，為研究人員節省小鼠飼養空間及費用，並保存珍貴之基因改造小鼠種原。
- 小鼠胚胎復育：將研究人員提供的胚胎凍管經解凍後，獲得解凍胚胎並移植至代理孕母鼠體內，使其懷孕並產出小鼠。
- 小鼠精子冷凍及體外受精：目前採用廣為國際間使用、日本熊本大學開發之精子冷凍技術，針對C57BL/6小鼠品系測試，持續研發中。
- 技術服務相關諮詢：除服務內容說明之外，亦提供基因改造小鼠相關之技術服務諮詢，包括載體設計、小鼠配種及基因型分析等。
《文/圖：基因轉殖鼠核心實驗室》