NHRI Communications
院務紀事
基因轉殖鼠核心實驗室—技術服務平台
Services by NHRI Transgenic Mouse Core
為促進國人健康及疾病治療，利用基因改造小鼠建立之人類疾病動物模式，已廣為生物醫療與新藥開發之用。以往院內研究人員欲取得研究相關之基因改造小鼠時，多自國外引進或自行產製。在引進小鼠過程中，除花費甚鉅、耗時甚久外，亦受到其智慧財產權與專利保護等諸多限制；而國內可提供相關技術服務之機構寥寥可數，且多集中於北部，研究人員在等候技術服務排程、動物運送與檢疫的過程中耗時費力、諸多不便。本院基因轉殖鼠核心實驗室即因上述需求而設立，提供高品質基因改造小鼠相關之技術服務，使院內研究人員得以有效獲得符合其研究所需之基因改造小鼠，以創造優良的人類疾病動物模式。本核心實驗室提供及規劃之技術服務項目包括：小鼠原核顯微注射、小鼠囊胚顯微注射、TALEN及CRISPR/Cas9顯微注射、小鼠淨化、小鼠胚胎冷凍保存、復育與技術服務相關諮詢等，服務內容簡述如下（其他服務說明請參考本核心實驗室網頁： http://tmc.nhri.org.tw/）：
- 小鼠原核顯微注射：以顯微操作設備將研究人員提供之轉殖基因，注射至小鼠受精卵之原核，再將其移植至代理孕母鼠體內，使其懷孕並產出攜帶轉殖基因之小鼠。
- 小鼠囊胚顯微注射：包括小鼠胚幹細胞之擴增、小鼠囊胚顯微注射及胚胎移植等，業已建立完成技術平台，並可成功地獲得具有生殖傳遞能力之嵌合小鼠。（服務流程規劃中）
- TALEN及CRISPR/Cas9顯微注射：近年來新興之TALEN及CRISPR/Cas9技術，可應用在基因剔除小鼠產製過程中，僅須將TALEN或Cas9的mRNA（Cas9需搭配guide RNA）以顯微注射方式注入受精卵，再將注射後之受精卵，移植至代理孕母鼠體內並懷孕產出，經篩選後即可獲得基因剔除小鼠，此舉大幅縮短傳統產製過程所需漫長之標的基因構築、胚幹細胞篩選及小鼠配種繁殖的時間。本核心實驗室已建立相關技術平台，並可順利產生基因剔除小鼠。（服務流程規劃中）
- 小鼠淨化：位於隔離房、攜帶特定病原之小鼠，經超數排卵及配種後，取其二細胞期胚胎，將其移植至乾淨之代理孕母鼠體內，使其懷孕並產出小鼠，再通過動物中心檢測後，即完成淨化程序。
- 小鼠胚胎冷凍：採用玻璃管法（vitrification）將小鼠八細胞期胚胎進行冷凍，所獲得之胚胎凍管則長期保存於液態氮桶，此舉為研究人員節省小鼠飼養空間及費用，更保存珍貴之基因改造小鼠種原。
- 小鼠胚胎復育：將研究人員所提供之胚胎凍管進行解凍後，移植解凍胚胎至代理孕母鼠體內，使其懷孕並產出小鼠。
- 技術服務相關諮詢：除服務內容說明之外，亦提供基因改造小鼠相關之技術服務諮詢，包括載體設計、小鼠配種及基因型分析等。
《文/圖：基因轉殖鼠核心實驗室葉諭容技術師》